Sommario:
- Quello che segue è una panoramica delle diverse fasi di un protocollo di colorazione con immunofluorescenza indiretta
- Come esegui l'immunofluorescenza?
- Come si usa l'immunofluorescenza in una cellula?
- Qual è un esempio di immunofluorescenza?
- A cosa serve la colorazione con immunofluorescenza?
Video: Come si esegue l'immunofluorescenza?
2024 Autore: Fiona Howard | [email protected]. Ultima modifica: 2024-01-10 06:39
Quello che segue è una panoramica delle diverse fasi di un protocollo di colorazione con immunofluorescenza indiretta
- Pianificazione degli esperimenti e preparazione dei campioni. …
- Fissazione del campione. …
- Permeabilizzazione cellulare. …
- Blocco. …
- Incubazione di anticorpi primari. …
- Incubazione di anticorpi secondari. …
- Controcolorazione e montaggio.
Come esegui l'immunofluorescenza?
Tutte le fasi di incubazione si svolgono a temperatura ambiente
- Lava le cellule due volte e usa le pinzette per posizionare con cura il vetrino coprioggetto con le cellule capovolte nella camera umidificata.
- Fissare con il 4% di formaldeide per 10 minuti e lavare 3 ×.
- Permeabilizzare con 0,1% TX-100/PBS per 15–20 minuti e lavare 3 ×.
Come si usa l'immunofluorescenza in una cellula?
Protocollo di immunofluorescenza per cellule aderenti
- Seme 1–1,5 x104 cellule per pozzetto di un vetrino a 4 camere in 500 mL di terreno di coltura. Incubare a 37°C al 5% di CO2.
- 32–36 ore dopo la semina cellulare, rimuovere il mezzo di coltura cellulare e sciacquare le cellule 3 volte utilizzando 500 µL di PBS 1X.
Qual è un esempio di immunofluorescenza?
Ad esempio, un ricercatore potrebbe creare anticorpi primari in una capra che riconoscono diversi antigeni e quindi impiegare anticorpi secondari di coniglio accoppiati con coloranti che riconoscono la regione costante dell'anticorpo di capra (" anticorpi coniglio anti-capra").
A cosa serve la colorazione con immunofluorescenza?
La colorazione dell'immunofluorescenza (IF) è una tecnica ampiamente utilizzata nella ricerca biologica e nella diagnostica clinica IF utilizza anticorpi marcati con fluorescenza per rilevare specifici antigeni bersaglio. Seguita dall'imaging, è una tecnica molto diretta in quanto puoi effettivamente vedere qualcosa.
Consigliato:
Come si esegue una flebectomia?
Sono fatti nella pelle vicino alla vena allargata. Il medico inserisce il gancio per flebectomia sotto la superficie della pelle e rimuove la vena varicosa attraverso la piccola incisione. Questa procedura richiede solitamente tra 30 minuti e un'ora .
Come si esegue l'architettura di microservizi?
Ecco i punti chiave a cui pensare in quel momento Mantieni la comunicazione tra i servizi semplice con un'API RESTful. … Dividi la tua struttura dati. … Costruisci la tua architettura di microservizi in caso di errore. … Enfatizza il monitoraggio per facilitare il test dei microservizi.
Come si esegue il ghusl obbligatorio?
Le azioni obbligatorie del ghusl devono essere eseguite affinché il ghusl sia ritenuto valido. In poche parole, le azioni obbligatorie sono sciacquare naso, bocca e tutto il corpo con acqua almeno una volta L'acqua deve raggiungere ogni parte del corpo esterno che è possibile risciacquare senza indebite difficoltà .
Come si esegue un pari mutuel?
Per inserire una scommessa, segui queste istruzioni: Sposta il primo round su "In corso" nel menu Round. Vai a Evento/Lega > Parimutuel > Dashboard. Seleziona lo scommettitore. Seleziona su chi scommette lo scommettitore.
Come ridurre la colorazione di fondo nell'immunofluorescenza?
Per ridurre il legame anticorpale non specifico e, di conseguenza, ridurre il segnale di fondo, si raccomanda di usare una soluzione bloccante prima dell'incubazione con gli anticorpi La soluzione bloccante più efficace sarà sia quello contenente siero della stessa specie in cui è stato prodotto l'anticorpo secondario .
