Uno può congelare e scongelare il buffer RIPA 2-3 volte senza perdere la sua potenza fintanto che viene conservato in ghiaccio durante il suo utilizzo (20-30 min). Conservare il tampone congelato a -80 gradi C.
Per quanto tempo posso conservare il buffer RIPA?
1. Se il tampone verrà utilizzato continuamente, si consiglia di mantenere il tampone 10x a 4°C per 1-2 settimane. Per periodi di tempo più lunghi, il tampone deve essere conservato a -20°C. Si consiglia di aliquotare un buffer 10x se devono essere eseguiti molti piccoli esperimenti.
Può essere memorizzato il buffer RIPA in?
Il tampone RIPA preparato deve essere aliquotato e conservato a - 20°C. Aggiungere gli inibitori della proteasi e/o della fosfatasi a un'aliquota scongelata prima dell'uso immediato. Un millilitro di tampone è sufficiente per lisare circa 5 milioni di cellule. …
Come si conservano i lisati RIPA?
Usa i lisati preparati il più rapidamente possibile e conservali il più breve tempo possibile. Conservare i lisati a -80℃ il più a lungo possibile. Per i lisati che dovranno essere conservati a lungo termine, trasferire le provette appena preparate in un congelatore disponibile a -80°C per prevenirne la degradazione.
Come si scongela il buffer RIPA?
Dopo aver rimosso la soluzione di lavaggio finale dalle cellule, aggiungere un volume appropriato di tampone RIPA (1 ml per 0,5-5 × 107 cellule) al pellet cellulare e mescolare o agitare brevemente per risospendere completamente le cellule. Incubare in ghiaccio o in frigorifero (2–8 °C) per cinque minuti.
