Qual è il modo migliore per separare i cloroplasti dal tampone?

2024 Autore: Fiona Howard | [email protected]. Ultima modifica: 2024-01-10 06:39

Per poter estrarre i pigmenti daI cloroplasti sono sospesi in un tampone di isolamento. Per poter estrarre i pigmenti dai cloroplasti, dobbiamo prima eliminare il tampone. Qual è il modo migliore per separare i cloroplasti dal tampone? usa una centrifuga per separare il

Come si isola un cloroplasto?

Nel metodo di isolamento con cloroplasti, la parete cellulare viene rotta meccanicamente utilizzando un frullatore o un omogeneizzatore. Quindi il tessuto fogliare ininterrotto e i detriti cellulari vengono rimossi mediante filtrazione. I cloroplasti vengono raccolti mediante centrifugazione utilizzando un gradiente di percoll.

Come si crea un tampone isolante con cloroplasti?

Preparare la quantità richiesta di tampone di isolamento cloroplasto 1X diluendo lo stock tampone 2X 1:1 con acqua dH2O Aggiungere 10 µL di soluzione BSA al 10% per ml di cloroplasto 1X Tampone di isolamento. Appena prima dell'uso, aggiungere 1 µ l di DTT per 1 ml di tampone di isolamento al cloroplasto. Etichetta questo buffer come 'Buffer completo'.

Cosa c'è in un tampone isolante a base di cloroplasti?

Il tampone di isolamento del DNA consisteva in 100 mM NaCl, 100 mM Tris-HCl (pH 8,0), 50 mM EDTA e 1 mM DTT La lisi del cloroplasto è stata ottenuta incubando il pellet di cloroplasto con 8 ml di tampone di isolamento del DNA, 1,5 ml di SDS al 20%, 20 µl di 2-mercaptoetanolo e 30 µl di proteinasi K (10 mg/ml) in una provetta da centrifuga a 55°C per 4 h.

Qual è il pH del tampone utilizzato per omogeneizzare le foglie di spinaci nel protocollo di isolamento dei cloroplasti?

Gli spinaci sono carichi di buoni cloroplasti e si isolano facilmente. Dovrai mettere le foglie in un frullatore a freddo con 0,1 M di tampone fosfato, pH 7,5 e 0,5 M di saccarosio per evitare che scoppino.